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酶联免疫试剂盒厂家讲讲其操作步骤

发布时间:2017-07-19      点击次数:141
   酶联免疫试剂盒操作步骤:
  1、确定本次检测所需的已包被抗体的酶标板孔数目。
  2、将倍比稀释的标准品各0.1ml依次加入一排7孔中,1孔只加样品稀释液的作为对照。处理后的标本按100ul每孔加入。
  3、酶标板加上盖,37℃反应90分钟。
  4、反应后用自动洗板机吸去酶标板内的液体;或甩去酶标板内液体,再对着吸水纸拍几下。洗涤2次。
  5、将准备好的生物素抗体工作液按每孔0.1ml依次加入。37℃反应60分钟。
  6、0.01M TBS或0.01M PBS洗涤3次,每次浸泡1分钟左右。
  7、将准备好的ABC工作液按每孔0.1ml依次加入。37℃反应30分钟。
  8、0.01M TBS或0.01M PBS洗涤5次,每次浸泡1-2分钟左右。
  9、按每孔0.1ml依次加入TMB显色工作液,37℃避光反应,反应过程中,要经常的观察,当肉眼可见标准品的前3-4孔有    明显的梯度蓝色,后3-4孔差别不明显时,即可加入TMB终止液0.1ml/孔。(显色反应zui长不要超过30分钟)。
  10、用酶标仪在450nm测定O.D.值。
  11、根据样品的吸光值在坐标上找出对应的浓度。用户也可以使用各种应用软件来计算。应记住由于样品稀释了N倍,其实际浓度应该×N。
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