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解读|ELISA 法快速检测食品中重金属含量的研究进展

发布时间:2018-01-08      点击次数:674

比重大于 4.5 的金属被称为重金属,如铬(Cr)、铅(Pb)、镉(Cd)、砷(As)、汞(Hg)、铜(Cu)等,它们往往在动物和植物体内不断积聚,再经由食物链富集,zui后进入人体并在人体内与蛋白质及酶等发生强烈的相互作用,使它们失去活性,从而危害人体健康。我国食品中重金属超标问题也时有发生,水产品、海产品、水果、蔬菜以及粮食等均存在重金属超标的现象。

 

目前,重金属检测已成为食品安全检测的一项重要内容。传统的重金属检测方法有很多,例如原子吸收分光光度法(AAS)、液相色谱法(HPLC)、原子荧光分光光度法(AFS)、电感藕合等离子体法(ICP)等。电感藕合等离子体法又分为电感藕合等离子质谱法(ICP-MS)和电感藕合等离子原子发射光谱法(ICP-AES)。经过多年的发展,传统的重金属检测方法已日趋成熟,例如HPLC 灵敏度高、操作简便、重复性好且可同时测定多种元素。但该方法检测费用高,流动相消耗大且多数有毒,并且可供使用的结合剂有限,给该方法带来了很多的局限性。这些传统的重金属检测方法均有各自的优点,也存在一些难以解决的问题:如有的方法仪器设备昂贵、专业技术要求高、难以应用于现场实时快速检测等。

 

自从酶联免疫法(Enzyme-linked immune sorbent assay,ELISA)被Engvall 等建立以来,广泛用于食品、医学检测,近年来许多学者研究用于重金属的检测,与传统检测技术相比,有操作简便、特异性强、灵敏度高、适用于现场检测等优点,因而 ELISA 法在重金属的检测中得以快速发展。

 

随着酶联免疫检测技术在重金属检测上的快速发展,ELISA 试剂盒的应用解决了传统检测技术的一些弊端,现已成为了一种快速、简便和可靠的检测手段。ELISA 检测方法只能在液相环境中进行,即只能检测离子态重金属,而金属往往以结合态存在于样品中,因此需要通过前处理使样品中待测的金属离子释放到液相检测环境中,同时还可除去干扰因子避免对后续检测结果的影响。因此,建立一套快速、、环保且适用于ELISA 法检测重金属含量的样品前处理的方法具有重要的意义。目前适用于ELISA 法快速检测食品中重金属含量的样品前处理方法主要有:湿式消化法、微波消解法、浸提法等。

 

ELISA法检测重金属常用方法

1

间接竞争法

间接竞争法的原理是待检测样品中的竞争物和重金属完全抗原共同竞争结合单克隆抗体相同表位,通过酶标二抗孵育,底物显色后可通过标准曲线得到待检测样品中的重金属离子的浓度。该方法是zui早使用的免疫学检测方法,该方法比较成熟和完善,也是目前应用zui多的方法。随着研究的深入,ELISA 法检测重金属样品灵敏度已经完全可以达到传统的技术的水平。

 

2

直接竞争法

直接竞争法的原理与间接竞争法类似,相对于间接竞争法来说,无需加二抗,一方面降低了实验成本、简化了操作步骤;另一方面其检测灵敏度高、特异性强。但由于起步相对较晚,应用没有间接竞争法普遍。Liu [38]等采用直接竞争ELISA法检测农产品中Cd2+,IC50值为2.30μg/L,检测限为0.2 μg/L,并表现出高特异性,并且结果与GFAAS法的检测结果的符合率高达99%,加之其简便性和经济性,完全适用于农产品中重金属的检测。

 

传统重金属检测方法比较成熟,灵敏度高,但需要专业技术人员以及仪器设备较大、较笨重且成本高。ELISA 法检测重金属存在检测过程操作简便、特异性强、灵敏度高且适用于现场检测等优点,是一种具有特异性强和灵敏度高的检测方法。随着研究的深入,ELISA法检测重金属样品也日臻成熟,灵敏度多已达到ng至pg级水平,加之ELISA法检测重金属的方便性,将在很多方面得到更广泛的应用。

 

【参考文献】

苟珍琼,兰洋,郑韵,等. ELISA 法快速检测食品中重金属含量的研究进展[J]. 食品与发酵工业,2017-9-19.

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