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选择elisa试剂盒要考虑哪些因素 

发布时间:2022-12-22      点击次数:74
    elisa试剂盒在实验室已经相当普及,绝大多数ELISA试剂盒都是用于检测未知样本中抗原的浓度。用试剂盒当然比自己慢慢摸条件快得多,ELISA试剂盒不仅可以让实验更便利,往往还更加。现在市面上的ELISA试剂盒既有国产也有进口,数量繁多令人目不暇接,怎样才能选出适用的产品呢?
  首先当然得根据我们所要检测的分子进行检测,除此以外也还有一些需要加以考量的因素。
  首先明确检测何种蛋白。
  第二步、明确编码该蛋白的基因与其它哪些物种同源性较好。
  第三步、寻找检测这些物种蛋白的试剂盒。
  第四步、咨询商家ELISA是试剂盒使用的抗体类型:多抗还是单抗?单抗是针对什么抗原决定簇的?
  第五步、做出自己的判断该买哪个试剂盒。
  ELISA试剂盒有多种类型,不过它们都有一个共同特点,就是进行抗原捕获。一般捕获形式包括将抗原吸附到微孔板或者用微孔板上的抗体进行捕获。In-cell ELISA和酶联免疫斑点ELISPOT是两种特殊的类型,In-cell ELISA需要将微孔板中培养的细胞进行固定和通透化,然后再用抗体原位检测。ELISPOT有点像蛋白印迹Western blot,先在带膜的微孔板中培养细胞,然后在膜上检测细胞分泌的抗原形成斑点。此外,我们还需要根据自身需要选择96孔板或是384孔板进行ELISA实验。
  通常人们使用双抗夹心法进行ELISA实验,双抗夹心法中抗原被夹在捕获抗体和检测抗体之间,这种方法既灵敏又有效,受到了许多研究者的青睐。不过有时候双抗夹心法并不是选择,例如有时候抗原特别小让两个大抗体难以附着,又或者抗体只有一个抗体结合位点。在上述情况下,竞争性ELISA就更为适用,这种方法是采用带标记的纯化抗原与样本中无标记的抗原进行竞争,以结合捕获抗体。
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