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孔雀石绿检测试剂盒使用指南

发布时间:2022-01-20      点击次数:281
  孔雀石绿检测试剂盒本试剂盒原理是竞争酶联免疫检测方法,利用萃取剂从样品中提取到孔雀石绿. 在固相载体微孔板中加入标准和处理的样品,然后加入孔雀石绿抗体,反应30分钟后洗板,然后加入HRP标记的孔雀石绿孵育30分后洗板,洗涤后加入显色剂,结合的酶将无色的显色剂转化为蓝色的产物;加入反应终止液后使颜色由蓝色变为黄色;在450nm波长进行检测,样品中的孔雀石绿浓度与吸收光强度成反比 。
 
  孔雀石绿检测试剂盒操作步骤:
 
  1. 使用前将试剂盒和样品处理物提前从冰箱中拿出来使其达到室温。装有洗液的洗瓶。
 
  2.从铝箔袋中拿出要求数量的微孔条,放入干燥剂并重新封好袋子以免微孔条受潮。
 
  3. 用移液器吸取75 μl 样品处理物到对应的测试孔 ,同时在每个孔中都加入75 μl 抗体溶液。
 
  4. 轻轻震动30秒使其混匀孵育30分。
 
  5. 孵育完成后,将微孔中的溶液倒入水槽中,用配好的洗板缓冲液清洗微孔。每孔每次至少加入250ul,微震荡洗涤后倒掉,重复三次,总共四次洗板。拍板,去掉残留的洗液。
 
  6. 每个孔加入150 μL 酶标结合物。
 
  7. 轻轻震动30秒使其混匀孵育30分。
 
  8. 孵育完成后,将微孔中的溶液倒入水槽中,用配好的洗板缓冲液清洗微孔。每孔每次至少加入250ul,微震荡洗涤后倒掉,重复三次,总共四次洗板。拍板,去掉残留的洗液。
 
  9. 每个孔加入150 μL 底物.孵育30分。
 
  10. 每孔加入 100 μL 终止液。
 
  11. 450nm 下读取每个孔的吸光度值(OD)。
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