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ELISA试剂盒试验之前要做哪些准备工作?

发布时间:2017-08-23      点击次数:805
ELISA试剂盒又叫酶联免疫试剂盒,自从60-70年代问世以来,得到*科研工作者的认可及推崇,在欧美及中国获得很大的推广,尤其是国内生化领域的长足发展。Elisa生物试验是一种敏感性高,特异性强,重复性好的实验诊断方法。由于其试剂稳定、易保存,操作简便,结果判断较客观等因素,已广泛应用在免疫学检验的各领域中。
 
在使用ELISA试剂盒进行试验之前要做哪些准备工作呢?
 
1. 仔细阅读说明书,确定试剂盒在有效期内。
2. 按说明书确定所有试剂是否齐全,完整的Sunny ELISA试剂盒包含预包被酶标板,检测抗体、链霉亲合素标记的HRP、标准品、标准品稀释液、TMB显色液、终止液、洗液等10个组分。另外要确认试剂盒以外的材料是否齐全,如酶标仪、移液器及枪头、加样槽、离心管、量筒、蒸馏水、稀释用聚丙烯试管等。
3. 实验前,将试剂盒从冰箱中取出,室温放置半个小时,以让试剂恢复到室温。
4. 将10×的检测缓冲液(Assay Buffer)稀释到1×,吸取10X浓缩Assay buffer 5mL至50mL离心管,加蒸馏水至 50Ml,震荡混匀备用。1×Assay buffer主要用于检测抗体、HRP等浓缩液的稀释。
5. 将20×的洗涤液稀释到1×,吸取20X洗液50mL至1L量筒,加蒸馏水至1000Ml,混匀,转移至干净容器内备用,洗涤液用于实验中的洗涤步骤。从冰箱中取出的浓缩洗涤液可能有结晶,属于正常现象,可用37℃水浴微加热使结晶完全溶解后再配制洗涤液,(加热温度不要超过50℃)使用时洗涤液应为室温。
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