您好!欢迎访问北京维德维康生物技术有限公司网站!
全国服务咨询热线:

18610315208

当前位置:首页 > 技术文章 > 酶联免疫试剂盒的使用和注意事项

酶联免疫试剂盒的使用和注意事项

发布时间:2017-06-30      点击次数:776
ELISA(酶联免疫吸附试验,酶联免疫试剂盒)是酶免疫测定技术中应用zui广的技术。其基本方法是将已知的抗原或抗体吸附在固相载体 ( 聚苯乙烯微量反应板 ) 表面,使酶标记的抗原抗体反应在固相表面进行,用洗涤法将液相中的游离成分洗除。

酶联免疫试剂盒的操作使用:
 
1、加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板,轻轻振荡混匀,37℃温育1小时。
2、甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
3、每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP,轻轻振荡混匀,37℃温育30分钟。
甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
4、酶联免疫试剂盒每孔加入底物A、B各50ul,轻轻振荡混匀,37℃温育10分钟。避免光照。
5、取出酶标板,迅速加入50ul终止液,加入终止液后应立即测定结果。
6、在450nm波长处测定各孔的OD值。

为保证实验质量,使用酶联免疫试剂盒时需注意:
 
(1)合理安排检测量,以免反应板过多造成洗板等待时间长。
(2)显色剂尽量在临用前配制,坚持不用过期显色剂,肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用。
(3)加样时保持显色剂不外流;A、B液应避免接触金属器械。加终止液时应避免产生气泡。
(4)加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。
北京维德维康生物技术有限公司
地址:北京市海淀区北清路156号中关村环保园地锦路9号院3号楼
邮箱:zhangqian@wdwkbio.com
传真:86-010-82780259
关注我们
欢迎您关注我们的微信公众号了解更多信息:
欢迎您关注我们的微信公众号
了解更多信息
扫一扫访问手机站扫一扫访问手机站
访问手机站